产品货号:
JN5075
中文名称:
ChipTag pAG转座体
英文名称:
BalbNGS ChipTag pAG-Transposome
产品规格:
12T
发货周期:
1~3天
产品价格:
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BalbNGS ChipTag转座体是ChipTag酶加上接头孵育而成,具有打断双链DNA,并插入接头的功能,而且具有与抗体结合的活性。基于它的功能,我们将其应用于蛋白质-DNA互作研究的CUT&Tag。CUT&Tag是蛋白质-DNA互作关系研究的新方法,相较于传统的ChIP-seq具有以下优点:省时高效,所需的细胞量少,背景信号低,可重复性好等,甚至可用于单细胞水平测序。CUT&Tag是研究体内蛋白与染色质DNA互相作用的有力工具,对基因调控、表观遗传等研究具有重大意义。
本制品是ChipTag蛋白与接头孵育后形成的转座复合体,转座复合体可以将基因组DNA打断成小片段并加上文库接头,通过PCR扩增,获得适合Illumina高通量测序平台专用的测序文库。2.0版ChipTag使用pAG-Tn5替换了原先的pA-Tn5,提高了效率,去除了抗体选择的限制性。

蛋白质-DNA互作研究,可替代ChIP-seq等方法,特别适用于小样本和单细胞的高效表观基因组分析。

组分 | 规格 |
BalbNGS ChipTag pAG-Transposome | 12μL |
5×AmpliMix | 200μL |
10×ChipTag Buffer(-) | 1mL |
0.5M MgCl2 | 25μL |
保存:-20℃,有效期3个月。

经多次柱纯化,SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带,PCR方法检测无宿主DNA残留,无核酸内、外切酶污染。

CUT&Tag实验测试
使用80000个细胞进行CUT &Tag实验,使用的二抗为山羊抗,如下图所示,获得的文库产量比pA-Tn5的多,使用pAG-Tn5代替pA-Tn5,可降低实验对二抗的要求。

Lane B:阴性对照(不加一抗);
Lane C:pA-Tn5 CUT&Tag扩增产物;
Lane D:pAG-Tn5 CUT&Tag扩增产物;
MK:DNA Marker。

单链接头序列
- Adaptor1:5’TCGTCGGCAGCGTCAGATGTGTATAAGAGACAG3’
- Adaptor2:5’GTCTCGTGGGCTCGGAGATGTGTATAAGAGACAG 3’
- ME:5’-pCTGTCTCTTATACACATCT-3’
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